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人脐带血间充质干细胞治疗脑梗死的临床疗效研究

James 干细胞之父 2022-11-08


随着人口老龄化的出现，脑血管发病率逐年上升，其造成的功能障碍大大降低了人们的生活质量。中枢神经系统在损伤后具有结构和功能重新组织的能力，即中枢神经系统具有高度可塑性。
尽管对脑卒中后神经功能缺失的治疗目前尚无统一有效的方法，但随着近年来干细胞治疗的深入研究，为神经功能重组带来新的希望。

本研究旨在探讨人脐带血间充质干细胞治疗脑梗死的疗效。
1、资料与方法
1.1   一般资料
选取2010年9月—2013年2月在沈阳市第一人民医院神经内科接受治疗的脑梗死患者100例，均符合全国第四届脑血管病学术会议制定的缺血性脑血管诊断标准。
纳入标准：⑴发病时间为14～30d，病情稳定；⑵神经功能缺损评分（NIHSS）8～24分。
排除标准：⑴恶性肿瘤；⑵局部或全身严重感染；⑶严重心、肝、肾功能障碍；⑷高度过敏体质或有严重过敏史；⑸凝血功能障，如血友病；⑹血清学检查阳性，如艾滋病、乙肝、梅毒等。
治疗前充分告知患者及主要家属治疗方案及风险，且均签署知情同意书。治疗方案经医院医学伦理委员会批准。
将患者随机分成两组，治疗组50例，其中男29例，女21例；平均年龄（61.4±11.3）岁。对照组50例，其中男27例，女23例；平均年龄（60.2±11.8）岁。两组患者性别、年龄间具有均衡性。


1.2   治疗方法
治疗前完善颅脑MRI、重要脏器彩超检查，完善血常规、尿常规、血凝系列、肝肾功能、血糖、血脂、心肌酶谱、风湿系列、肝炎系列、肿瘤系列、HIV及梅毒血清学抗体检查。
1.2.1  对照组 给予阿司匹林肠溶片(拜耳医药保健有限公司) 0.1g，口服1次/d。阿托伐他丁钙（辉瑞制药有限公司）20mg，口服1次/d。对原发基础疾病继续血常规药物治疗，如控制血压、血糖等。
1.2.2  治疗组 在对照组治疗基础上给予人脐带血间充质干细胞（XXXXX公司研发，辽宁省血液中心制备）治疗，1次/5d，连续治疗6次。用法：在洁净层流治疗室对患者进行人脐带血间充质干细胞治疗，其中腰穿鞘内注射者20例，腰穿术后去枕平卧6～8h；静脉滴注者30例，每次滴注人脐带血间充质干细胞悬液30ml(内含细胞数约3×107个)，治疗后，密切观察病情変化及不良反应。两组均配合康复训结治疗。
1.3   疗效评定标准
根据美国国立卫生院NIHSS和简式Fugl-Meyer运功功能(FMA)评分评价治疗前，治疗后1、2、3个月时两组患者神经功能缺损情况。
1.4   统计学方法
采用SPSS18.0统计软件包进行数据分析，计量资料以(`x± s)表示，组间比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
2.1   NHISS评分比较
治疗前、治疗后1个月、治疗后2个月，两组患者NHISS评分比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗后3个月，治疗组NHISS评分低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05，见表1)
2.1   FMA评分比較
治疗前、治疗后1个月、治疗后2个月，两组患者FMA评分比較，差异均无统计学意义(P>0.05)；治疗后3个月，治疗组FMA评分高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05，见表2)
2.1   不良反应
治疗组有1例患者出现低热反应，对症治疗后症状迅速缓解，余未见不良反应。
3、讨论
间充质干细胞是一种来源于中胚层，具有多向分化潜能的一类干细胞，研究证明间充质干细胞不仅具有向骨、软骨、脂肪及肌原细胞分化潜能，还具有向神经元分化的潜能。
近10年，随着现代医学技术和再生医学的飞速发展，以干细胞为基础的细胞治疗法在神经系统疾病中的治疗研究逐渐增多。而人脐带血间充质干细胞是目前使用最为成熟的一种间充质干细胞。
人脐带血间充质干细胞是组织工程理想的种子细胞，除具有获取方便、来源丰富、容易扩增、能透过血-脑脊液屏障等优点；还具有以下优点：
(1)采集脐带血对产妇和新生儿无任何危害；
(2)细胞更原始，有更强的增殖分化能力；
(3)免疫原性低，不会触发免疫反应及移植物抗宿主反应；
(4)不会有肿瘤细胞、病毒和病原微生物的感染及传播概率相对较低；
(5)不涉及社会、伦理及法律方面的诸多争议。
传统观念认为脑组织一旦发育成熟，所含有的神经元群在受损伤后是无法取代的，但最近的资料表明在成年脑组织内也存在具有再生与分化能力的神经干细胞。这些干细胞在正常情况下仅表现出较低的再生分化能力。
不过在脑受损后，病灶区的神经干细胞因微环境改变而被激活，特别是在神经源性生长因子刺激下，能以较高的速率分裂分化以及取代坏死的神经元或胶质细胞达到修复作用。
脑缺血时，在损伤侧神经干细胞增生的同时，健侧的室管膜下区(SVZ)和海马颗粒下层(SGZ)也有神经干细胞增殖分化。
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目前研究认为，间充质干细胞治疗脑梗死的可能机制有：
(1)间充质干细胞移植入脑后，在脑内创造适宜的局部微环境，能形成表达神经元样细胞或星形胶质细胞，产生的细胞可在受损部位周围存活甚至移行至全脑，通过细胞替代作用更换机体已经死亡或受损的神经元，修复受损神经网络；
(2)间充质干细胞在中枢神经系统Niche下能分泌脑源性神经营养因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子等营养因子，或者刺激损伤部位产生内源性生长因子，促进损伤组织的修复并减少细胞凋亡；
(3)间充质干细胞是受损部位新生血管的主要组成细胞，可分化成血管内皮细胞和细胞外基质，促进血管新生。
本研究结果表明，在脑梗死治疗初期，两组患者NHISS评分和FMA评分无差异；治疗后3个月，治疗组NHISS评分低于对照组，FMA评分高于对照组。其机制可能是：间充质干细胞需要一定时间才能分化成成熟的神经元，且神经元之间也需要通过轴突出芽、突触形成，才能构建较完善的神经网络，完成脑功能重组，恢复神经功能。
人脐带血间充质干细胞治疗脑梗死具有良好的有效性及安全性，在神经系统疾病的治疗中有望发挥更加积极的作用。但本研究由于样本有限和随访时间短，其远期疗效及不良反应还需要进一步观察。
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